影響戊二醛消毒液殺菌效果的因素主要有以下：

　　（1）濃度和作用時間：隨著濃度的增加和作用時間的延長，殺菌作用增強。但質量分數低于2%的戊二醛溶液，無論怎樣延長殺菌時間，也不能取得可靠的殺細菌芽孢效果。因此，殺滅細菌芽孢需用質量分數大于2%的戊二醛消毒液。

　　（2）溶液酸堿度：酸性戊二醛消毒液的殺菌作用明顯低于堿性戊二醛，但隨溫度升高差異逐漸減小。在pH4.0～9.0范圍內，隨著pH值的增加殺菌作用增強；pH7.5～8.5時殺菌作用最強；pH＞9時，戊二醛消毒液迅速聚合，殺菌作用迅速喪失。

　　（3）溫度：在較低溫度下也有殺菌作用。隨溫度升高，戊二醛消毒液殺菌作用增強。

　　（4）有機物：有機物使殺菌作用減弱，但有機物對戊二醛消毒液殺菌作用的影響比其他消毒劑小，20%小牛血清和1%全血對2%戊二醛的殺菌效果基本無影響。

　　（5）非離子表面活性劑及其他理化因子的增效作用：聚氧乙烯脂肪醇醚為非離子表面活性劑，在戊二醛溶液中加入0.25%聚氧乙烯脂肪醇醚配制成的強化酸堿性戊二醛，穩定性和殺菌效果都明顯提高。超聲波、遠紅外線與戊二醛消毒液有協同殺菌作用。

        市面上銷售的戊二醛通常是質量分數為50%、20%、2%酸性戊二醛溶液。為提高穩定性并增強殺菌效果往往加有聚氧乙烯脂肪醇醚或其他表面活性劑，稱為強化戊二醛。

消毒滅菌時通常使用2%戊二醛溶液，常用下列三種劑型：

（1）酸性強化戊二醛：由2%戊二醛加入0.25%聚氧乙烯脂肪醇醚而成，pH值在3.2～4.6。酸性強化戊二醛溶液具有很好的殺菌作用，但對細菌芽孢的殺滅速度低于堿性戊二醛溶液；其穩定性好，可在室溫貯存18個月。2%酸性強化戊二醛可直接用于物品的消毒與殺菌。

（2）中性戊二醛：由酸性強化成戊二醛加碳酸氫鈉調整溶液pH值至7.0即成中性戊二醛；其穩定性比堿性戊二醛溶液好，但不及酸性強化戊二醛，在室溫下可使用3～4周。市售強化中性戊二醛和強化堿性戊二醛通常為二元包裝，即碳酸氫鈉和亞硝酸鈉與戊二醛分開包裝，用前混配。

（3）堿性戊二醛：用碳酸氫鈉將2%戊二醛溶液的pH值調至7.5～8.5，稱堿性戊二醛。堿性戊二醛溶液對細菌芽孢的殺滅速度比酸性和中性戊二醛溶液快。堿性戊二醛溶液不穩定，室溫放置2周，濃度即明顯降低，殺菌作用也明顯減退。